產(chǎn)品簡介
EZ Trans Pro細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（GMP），作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑，其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用，并通過胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞。

產(chǎn)品型號：AC04L032

更新時(shí)間：2025-06-08

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：2060

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

細(xì)胞生物學(xué)

無血清培養(yǎng)基基因與細(xì)胞治療外泌體研究其他血液制品動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 常用培養(yǎng)基平衡鹽溶液細(xì)胞增殖與毒性細(xì)胞轉(zhuǎn)染細(xì)胞凋亡支原體檢測與祛除細(xì)胞污染預(yù)防與清除細(xì)胞分離活體成像細(xì)胞染色報(bào)告基因細(xì)胞株細(xì)胞組織運(yùn)輸保存無血清細(xì)胞存凍液轉(zhuǎn)染試劑

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品牌	其他品牌	貨號	AC04L032
供貨周期	現(xiàn)貨	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合

EZ Trans Pro細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（GMP）

產(chǎn)品描述
EZ Trans Pro細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（GMP），作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑，其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用，并通過胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞。
本產(chǎn)品經(jīng)過李記生物的優(yōu)化處理，具有轉(zhuǎn)染效率高，細(xì)胞毒性低，操作簡單，重復(fù)性好，適用范圍廣等特點(diǎn)。
訂購信息

產(chǎn)品名稱	貨號	規(guī)格	價(jià)格
EZ Trans Pro細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（GMP）	AC04L032	5 mL	2400
EZ Trans Pro細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（GMP）	AC04L033	50 mL	8800
EZ Trans Pro細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（GMP）	AC04L034	500 mL	48000

運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。4℃保存，有效期12個(gè)月。【注】：不可冷凍！
使用方法（以 24 孔板為例，其他培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染請參考表1）
1. 接種細(xì)胞
對于貼壁細(xì)胞，轉(zhuǎn)染前18-24 h進(jìn)行鋪板（不含抗生素），使其在轉(zhuǎn)染時(shí)的密度大約在80%左右。對于懸浮細(xì)胞，轉(zhuǎn)染當(dāng)天，配制EZ Trans-DNA復(fù)合物之前進(jìn)行鋪板，每500 µL生長培養(yǎng)基中加入4~8×10⁵cells。
【注】：培養(yǎng)液中的血清不影響轉(zhuǎn)染效率。轉(zhuǎn)染試劑使用量受細(xì)胞類型及其他實(shí)驗(yàn)條件影響，建議初次使用時(shí)設(shè)置梯度進(jìn)行優(yōu)化最佳使用量。
2. 準(zhǔn)備EZ Trans-DNA復(fù)合物
（1）對于每孔細(xì)胞，將1 μg質(zhì)粒DNA稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基（或者OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基），混勻。
（2）對于每孔細(xì)胞，將3 μL EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基（或者OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基），輕輕混勻。
【注】：無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基是稀釋液，不能使用含血清的培養(yǎng)基進(jìn)行DNA和EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑的稀釋。因?yàn)?/span>EZ Trans-DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物的形成過程不能含有血清。
（3）將稀釋好的EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑盡快全部加入到已稀釋好的質(zhì)粒DNA中，輕輕混勻。
【注】：此混合的順序不能反向進(jìn)行。
（4）室溫放置10-15 min，以形成EZ Trans-DNA復(fù)合物。
3. 轉(zhuǎn)染細(xì)胞
（1）將上述80 μL EZ Trans-DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物均勻滴入到含細(xì)胞的培養(yǎng)皿中。輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)皿或輕微振蕩，讓EZ Trans-DNA復(fù)合物分散均勻。
（2）在37℃，5% CO₂培養(yǎng)箱培養(yǎng)6-18 h，去除含EZ Trans-DNA復(fù)合物的培養(yǎng)液，更換新的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)至對轉(zhuǎn)入基因表達(dá)分析。
【注】：篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株，轉(zhuǎn)染細(xì)胞24 h后，將細(xì)胞傳代至新鮮的生長培養(yǎng)基中（將細(xì)胞稀釋10倍以上），在37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育24 h，加入篩選培養(yǎng)基。在有轉(zhuǎn)染抗性基因相匹配的藥物篩選條件下，約 1～2周可篩選到耐藥性克隆，在這期間需經(jīng)常更換含篩選藥物的生長培養(yǎng)基。

注意事項(xiàng)

本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
質(zhì)粒質(zhì)量：請務(wù)必使用高純度無內(nèi)毒素轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒。通過260 nm光吸收測定DNA 濃度，260 nm / 280 nm比值確定 DNA 純度（比值應(yīng)該在1.8～2.0的范圍之內(nèi)）。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。
細(xì)胞條件：使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保細(xì)胞沒有被細(xì)菌、真菌或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞，請?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用胎牛血清（貨號：AC03L055）培養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)液要求：EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑可用于有血清培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)染，并且轉(zhuǎn)染前不需要換培養(yǎng)基。但是，制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物時(shí)要求用無血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉(zhuǎn)染試劑，因?yàn)檠鍟?huì)影響復(fù)合物的形成。確保細(xì)胞培養(yǎng)液沒有被細(xì)菌、真菌或支原體污染。轉(zhuǎn)染時(shí)培養(yǎng)液中不添加抗生素。
DNA濃度和EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑量的優(yōu)化：DNA濃度和轉(zhuǎn)染試劑使用量受細(xì)胞類型及其他實(shí)驗(yàn)條件影響，初次使用應(yīng)優(yōu)化DNA濃度和轉(zhuǎn)染試劑量以得到最大的轉(zhuǎn)染效率。使用者可嘗試每 1 μg DNA使用 1～4 μL體積EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。DNA和轉(zhuǎn)染試劑的比例，通常推薦是1:2~1:5。

表1：不同培養(yǎng)體積對應(yīng)的待轉(zhuǎn)DNA、EZ Trans、稀釋液用量

培養(yǎng)器皿	培養(yǎng)液體積（mL）	DNA量（μg）	EZ Trans (μL)	稀釋液(μL)
48孔板	0.3	0.5	1.5	2 × 25
24孔板	0.5	1	3	2 × 40
12孔板	0.75	1.5	4.5	2 × 60
6孔板	1	3	9	2 × 125
35 mm培養(yǎng)皿	1	3	9	2 × 125
60 mm 培養(yǎng)皿	3	6	18	2 × 250
100 mm 培養(yǎng)皿	9	12	36	2 × 500

【注】：該表使用量僅供參考，具體使用量還需根據(jù)細(xì)胞類型及其他實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化。使用時(shí)DNA（μg）: EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（μL）比值保持在1:2~1:5。

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